Детаљно објашњење испализације реагенса у ПЦР експериментима

Детаљно објашњење испализације реагенса у ПЦР експериментима.

У ПЦР експерименту, након додавања реакционог система, пажљиво покривамо поклопац и више пута потврђујемо да је поклопац затворен да би се избегла испализација реагенса. Али понекад имамо и сумње: Потврдили смо да је поклопац чврсто затворен, али након завршетка експеримента, реагенс ће и даље испаравати. шта је разлог?

У ствари, нестабилност реагенса један је од најчешћих проблема у ПЦР експериментима, а постоји много фактора који утичу на испализацију реагенса.

Испаравање се односи на то током ПЦР експеримента, реакциони раствор испарава на високом температуру, а затим кондензира на зиду боца или горњи поклопац за формирање водене магле или капљице воде или директно преливени од ваздушног празнине боце у промени концентрације реакционог раствора. Промјене, количина реакционог раствора се смањила, а неки су чак и испарили до сува, што резултира неважећим експериментима.

1. Притисак топле поклопца, температура

У ПЦР експериментима обично загревамо поклопац за спречавање кондензације реагенса паре. Температура грејаног поклопца је обично већа од оног реакционог раствора да се спречи кондензацију испарења.

Термални циклени циклени грејни поклопци могу се отприлике поделити у следеће четири врсте: неподељиве поклопце за грејање, подесиви поклопац грејања, адаптивно пуњење грејања и аутоматско грејање. Подесиви загрејани поклопац садржи компресију за прст. Ако није чврсто затезање, реагенси ће испарити. Испаравање ивица може се минимизирати повећањем притиска на загрејаном поклопцу. Понекад прекидање може да прикупи цев и уврните дугме. У нормалним околностима, електрични паметни поклопац грејања може аутоматски открити потрошне машине различитих висина, а притисак је уједначен и константан, чиме се смањује испаравање реагенса и ручних грешака и побољшање експерименталне тачности и поновљивост.

2. Деформација потрошног материјала

За цурење паре, већина људи мисли да топли притисак топле није довољан. Притисак врућег поклопца је веома важан, али то је само један аспект. У ствари, потрошни материјал је такође веома важан.

ПЛЦР плоче са отвореним отворима обично су направљени од пластичних материјала који се увелике проширују и деформишу након грејања. Стопа топлотне експанзије ПЦР металне базе која се користи за постављање ПЦР ОриФице плоче је изузетно ниска, а плоча за ПЦР ОриФице не може се нормално проширити по авиону након топлотног експанзије. Избушени држава чини горњи поклопац топлоте који не може у потпуности да се обратите површини плоче ПЦР ОриФице, што је резултирало неравномерном температуром и притиском, што изазива испаравање реагенса на ивици ПЦР ОриФице плоче и утиче на ефекат откривања ПЦР-а.

3. Потрошни материјал није чврсто запечаћен

Затезање топлотног поклопца и потрошни материјал не значи да је поклопац ПЦР цев чврсто затворен, а квалитет плоче за ПЦР добро је неуједначен. Потрошни материјал високог квалитета, површина млазнице и поклопца су глатка, а заптивач иза поклопца кутије је добар и није лако процурити. Инфериорни потрошни материјал имају неуједначене изливе и радијалне линије, које лако могу да изазове цурење или чак и пресуши.

Стога у ПЦР експериментима покушајте да изаберете висококвалитетни и погодни потрошни материјал. Истовремено, реакциони систем се може проширити како би се смањило утицај испаравања система на реакцију.