Питања заптивања и контаминације у вишеслојним ћелијским културама

Учитавање и руковање са више бунарних плоча ћелијских култура:

Плоча за културу ћелијске културе такође следи принцип строге асепса приликом обављања ћелијских операција. Све операције морају бити стандардизоване и научне, а неће проузроковати додатни утицај на раст ћелија. Најчешћи проблем је како осигурати униформност ћелија након додавања узорка и минимизирати утицај промене медија на стање раста ћелија.

питати:
Поклопац од 96 и 24-бунар култура или петри јела су врло лабави, што је погодно за вентилацију, али ће бактерије, калуп и други загађивали такође ући?

одговор:
Поклопац је врло лабав, који припада полупроизтрци култури, а сврха је да се прозрачи (у ствари, то је да ЦО2 буде да се ЦО2 изван јела у култури потпуно размени са културним јеловима и одржава пХ вредност културе Средње).
Све има предности и недостатке, што наравно повећава могућност загађења. Поред тога, то узрокује течност у јелу да испари, што је примјетно за прецизно дозирање лекова. Стога су потребне следеће две мере: а. Зрак у инкубатору мора бити чист (редовна ултраљубичасто светло, остручавање алкохола и инкубатор треба да се отвори и затвори што је мање могуће) б. Влажност у инкубатору увек се мора чувати на 100% (судопер са стерилном дестилованом водом смештеном у инкубатор).
Баш као петри јело, такође је контејнер са поклопцем наглавачке, и неће бити загађен. Углавном због негативног притиска протока ваздуха који се генерише "Л" ивица поклопца, постоје микроорганизми причвршћени на прашину, а прашина коју проток протока не може проћи кроз ивицу поклопца који ствара негативан притисак. Вентилациони ефекат је само кроз дифузију ваздуха и неће се генерисати проток ваздуха, па ће само дисати и не продирати у бактерије.

питати:
Користећи плочу од 24 јажице, у неким од бунара налазе се операције (у ултра-чистом клупи) и постоје ћелије које треба култивирати у другим бунарима. Бринем се да ће то изазвати контаминацију. Не знам на шта да обратим пажњу?

одговор:
Ако је операција стандардизована у ултра-чистим клупи, то би требало бити у реду. Мислим да можете да направите пуну употребу поклопца културне плоче, покушајте да изложите само рупе које треба да управља и покривају остале рупе са навлацима.
Размотрити свеобухватно пре употребе и пуне употребе свих рупа; Ако требате само да користите неколико рупа, можете да користите само једну страну и покријте остатак поклопцем. Навикла сам да користим прву рупу (погодно је додати узорке у десну руку).

Када радите, користите неколико стаклених слајдова да бисте подигли једну страну плоче, не отварајте омот у потпуности, углавном нема проблема.
Дистрибуција и решења неравне ћелије

питати:
Ћелије се инокулирају на тањири културе, а ћелије се увек окупљају у периферном делу, како да се носе са њим?

одговор:
Могу ли да вас питам како су ваше ћелије помешане? Да ли је то пипетирање или тресење културне плоче? Ако је то последње, и ако се уздрма у кругу, врло је вероватно да ће ћелије бити бачене на периферни део због центрифугалне силе, што је резултирало мање ћелијама у средини. Више од четири недеље!
Овде је добар начин: пре него што гајите семенску плочу ставите у инкубатор у инкубатор неколико сати засићености, а затим га извадите. Сила треба да буде лагана када садњујете ћелије. Додавање полако омогућава суспензију ћелије да тече у бунари плоче, а култивисане ћелије у основи равномерно расту. Не заборавите да се никада не трестите са шејкером, или ће се ваше ћелије спојити као што сте рекли.
Мањи пречник рупе културне плоче, то је очигледнији овај феномен. Ова појава је неизбежна за плоче са 24 и 96 јажица, јер се течност придржава зида тако да културно решење у бунару не формира ниво течности, али периферија је висока, баш као што је конкавно огледало. Међутим, приликом коришћења ове две врсте плоча са отворима, није могуће додати довољну количину културе раствора због потребе за додатном интервенцијом, тако да ће ћелије појавити "ивица колекција" заједно са културним решењем. Зависи од тога који показатељи морате да посматрате. Ако је МТТ, имунохистохемија ће утицати на резултате због слојева ћелија.
Када пробаве ћелије, обратите пажњу да равномерно пазите на пипетирање да бисте избегли ћелијске грудвице, а количина културе у бунари треба да буде довољна. Генерално, додајте довољно раствора културе приликом инокулирања и промените решење једном приликом додавања интервенције. Количина културне раствора додаје се у решење за интервенцију једнака је количини културе у тренутку инокулације, у овом случају, појава "сета" ивице "ће се побољшати, тако да бисте га могли и покушати.

питати:
Оно што сам учинио био је експеримент за формирање плака. Најбоље је ширити ћелије у јединственом слоју. Већина рупа је у реду када је вирус инокулиран, а неки од њих нису уједначени. Постоје велике разлике у ћелијској групи. Желео бих да вас питам коју методу користите приликом додавања ћелија?

одговор:
Кључно је за пипету ћелије у једно ћелијску суспензију након пробаве! Проверите да ли је број ћелија у сваком добро у складу са цепањем плоче!
Наравно, постоје и фактори прераде. Паралелизам између бунара је такође веома важно. На пример, приликом додавања лека помешајте лек након разблажења да бисте осигурали да је концентрација сваког бунара доследна!
Поред тога, приликом додавања ћелија и лекова, тест групу и контролну групу треба додати за избјегавање разлике у ћелијској густини и концентрацији лекова изазваних редоследом додавања узорака!

питати:
Пухање је већ униформно, али да је плакљива, 6 рупа и 24 рупе увек помало неуједначена, а мало концентрисана у средини. Штавише, очигледно је да се бројање ради и после дана или два густина сваке рупе је другачије, што ће утицати на откривање. Постоји ли добар начин?

одговор:
Ако користите пипету пастера, не усисавајте превелико сваки пут, јер ће ћелије у пипету аутоматски потонути, често је број ћелија у првих неколико рупа велик, а ћелијска суспензија је често уједначена и течност ће Пратите руту С-облик.
Ако користите пипету, савети треба да се обрађују и уклањају како би се избегло оштећење ћелија, тако да сваки пут када се течности узима одговара добро. Тачније је додавање рупе за једну на једну са врхом. Али такође обратите пажњу на мешање суспензије.

Да бисте поставили паралелну групу, н мора бити довољно велика (можете је израчунати).

Не тресе се након преплате, јер ће се тресење проузроковати да ће ћелије агрегирати према центру. Најбоље је једном да дате једном.

Плоча порозних ћелија културе Иунгиуе Медицал је увек сматрала контролу квалитета као живот предузећа и спровела континуирано унапређење конкурентности предузећа. Компанија се увек придржава предузетничког духа придржавања закона и прописа, строга самодисциплина, а да је попустљива и одважна да преузме одговорност као стандард у раду, одржавајући и проширивање тржишта са одличном квалитетом и одличном и одличном услугом потребе купаца у највећој мери. . Вин-вин са купцима је наш развојни циљ. Ионгиуе Медицал! Ваш поуздан партнер. Спремни смо да искрено сарађујемо са вама да створимо бољу будућност.